中央分子診断
概要
国立成育医療研究センターでは、病理診断部と研究所小児血液・腫瘍研究部が協力して、日本小児がん研究グループ（JCCG）が実施している小児がん臨床研究の中央分子診断のうち、固形腫瘍の遺伝子診断と、血液腫瘍の細胞マーカー診断（抗体を用いて目印となる分子を検出する免疫学的診断）を担当しています。
血液腫瘍では、塗抹標本の形態と細胞化学検査による診断が基本ですが、形態のみでは診断が難しいことがあります。その場合に、細胞マーカーを検査することによって、正確な診断が可能な場合があります。また、もっとも頻度が高い急性リンパ芽球性白血病（Acute lymphoblastic leukemia, ALL）では、細胞マーカーによる診断と、タイプ分類が、治療法の選択の上で必須になります。
国内の小児血液腫瘍の治療は、JCCGの血液腫瘍分科会（JPLSG）が行っている臨床研究に統一されていますが、成育医療研究センターは三重大学、大阪大学（2017年3月20日まで）と協力、分担して、国内で発症するすべての小児血液腫瘍の患者さんを対象とする細胞マーカーの中央診断を担当しています。
JPLSGは、小児がん研究グループ (CCLSG)、日本小児白血病研究グループ (JACLS)、九州山口小児がん研究グループ (KYCCSG)、東京小児がん研究グループ (TCCSG)が連携して組織している治療研究グループですが、成育医療研究センターでは、このうちTCCSGとKYCCSGの参加施設の患者さんの中央診断を担当しています。
細胞マーカー中央診断では、JPLSG免疫診断ワーキンググループ（現 免疫診断委員会）、成育医療研究開発費26-20などの研究によって検討され、決定された、共通の解析項目を、完全に同じ試薬を使って解析しています。従って、国内で発症したすべての小児血液腫瘍の患者さんは、完全に同じ中央診断を受けることができます。
体制
小児血液腫瘍 細胞マーカー中央診断 担当分担
小児血液腫瘍 細胞マーカー中央診断 共通パネル
| | | FITC | PE | PC7 | APC | PerCP/KO |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 細胞表面 | 1 | IgG1 | IgG1 | IgG1 | IgG1 | CD45 (gating) |
| 2 | Kappa | CD13 | CD19 | Lamda | ||
| 3 | CD65 | 7.1 | CD10 | CD33 | ||
| 4 | CD66c | CD24 | CD34 | HLA-DR | ||
| 5 | Mue | CD22 | CD20 | CD56 | ||
| 6 | CD58 | CD11b | CD117 | CRLF2 | ||
| 7 | CD4 | CD8 | CD3 | CD5 | ||
| 8 | CD36 | CD42b | CD61 | CD14 | ||
| 9 | CD99 | CD7 | CD2 | CD38 | ||
| 10 | CD21 | CD64 | CD41 | CD1a | ||
| 11 | CD15 | TCR-γ/δ | CD235a | TCR-α/β | ||
| 15 | CD263/DCR1, TRAIL-R3 | CD261/DR4, TRAIL-R1 | CD95/FAS | CD133/1 | ||
| 16 | CD264/DCR2, TRAIL-R4 | CD262/DR5, TRAIL-R2 | CD27 | CD244 | ||
| 細胞内 | 12 | cy-IgG1 | cy-IgG1 | cy-IgG1 | cy-IgG1 | CD45 (gating) |
| 13 | cy-TdT | cy-MPO | cy-CD3 | cy-CD79a | ||
| 14 | cy-Mue | cy-CD22 |
細胞マーカー中央診断では、完全に同じ試薬を用いて、共通の解析を行っています
JPLSG ALLの免疫学的診断基準
-
T-ALL
CD3陽性 かつ CD2, CD5, CD7, CD8のうち１つ以上が陽性
-
B-lineage
CD19, CD79a, CD20, CD22のうち ２つ以上が陽性
1) B-precursor ALL
IgκとIgλが陰性
2) Pre-B ALL
細胞質内μ鎖陽性、かつIgκとIgλが陰性
3) B ALL
Igκ または Igλ 陽性（μ鎖の発現は必須ではないが重要な参考所見とする）
成育医療研究センターで実施している小児固形腫瘍の遺伝子診断と その対象疾患 （診断確定に有用な染色体転座と融合遺伝子）
| 腫瘍名 | 転座 | 融合遺伝子 | RT-PCR | FISH | 特異性 |
|---|---|---|---|---|---|
| Ewing肉腫ファミリー腫瘍 | t(11;22)(q24;q12) | EWS-FLI1 | ○ | ○EWS | ○ |
| t(21;22)(q22;q12) | EWS-ERG | ○ | ○EWS | ○ | |
| t(7;22)(p24;q12) | EWS-ETV1 | ○ | ○EWS | ○ | |
| t(17;22)(q12;q12) | EWS-E1AF | ○ | ○EWS | ○ | |
| t(2;22)(q33;q12) | EWS-FEV | ○ | ○EWS | ○ | |
| t(16;21)(p11;q22) | FUS-ERG | ○ | ○FUS | △ | |
| t(2;16)(q33;p11) | FUS-FEV | ○ | ○FUS | ○ | |
| 胞巣型横紋筋肉腫 | t(2;13)(q35;q14) | PAX3-FKHR | ○ | ○FKHR | ○ |
| t(1;13)(p36;q12) | PAX7-FKHR | ○ | ○FKHR | ○ | |
| 小児腎細胞癌 | t(X;1)(p11.2;q25) | ASPL-TFE3 | ○ | ○TFE3 | △ |
| t(X;1)(p11.2;q21) | PRCC-TFE3 | ○ | ○TFE3 | ○ | |
| t(X;1)(p11.2;p21) | PSF-TFE3 | ○ | ○TFE3 | ○ | |
| Inv(X)(p11;q12) | NonO-TFE3 | ○ | ○TFE3 | ○ | |
| t(X;17)(p11.2;q23) | CLTC-TFE3 | ○ | ○TFE3 | ○ | |
| t(6;11)(p21;q13) | Alpha-TFEB | ○ | ○ | ||
| 先天性・乳児線維肉腫 | t(12;15)(p13;q25) | ETV6-NTRK3 | ○ | ○ | ○ |
| 先天性間葉芽腎腫 | t(12;15)(p13;q25) | ETV6-NTRK3 | ○ | ○ | ○ |
| 線維形成小細胞腫瘍 | t(11;22)(p13;q12) | EWS-WT1 | ○ | ○ | ○ |
| 滑膜肉腫 | t(X;18)(p11;q11) | SYT-SSX1 | ○ | ○ | ○ |
| t(X;18)(p11;q11) | SYT-SSX2 | ○ | ○ | ○ | |
| 胞巣状軟部肉腫 | t(X;17)(p11;q12) | ASPL-TFE3 | ○ | ○TFE3 | △ |
病理所見に応じて、テーラーメイド的に必要な検査を実施しています
実績
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日本小児がん研究グループ 血液腫瘍分科会（JPLSG）小児血液腫瘍の全国統一中央分子診断 解析症例数
TCCSG マーカー診断統計 (2007)
